Die zweite Etappe der TotA 2025 (Mezzolombardo-Sterzing/Ratschings) ist mit 178 Kilometern und einem Höhenunterschied von 3.750 Metern das längste und anspruchsvollste Teilstück der Rundfahrt. Nach dem Start in Mezzolombardo im Trentino beginnt die Strecke zunächst flach, ehe der Anstieg mit Bergwertung am Monte San Pietro sowie ein anschließender Abschnitt mit schnellen Wechseln zwischen Anstiegen und Abfahrten den Fahrern konditionell alles abverlangen.
Der entscheidende Teil dieser Etappe beginnt jedoch erst nachdem das Fahrerfeld das Trentino hinter sich gelassen hat: In der zweiten Etappenhälfte geht’s über einen langen, leicht ansteigenden Abschnitt in das Südtiroler Städtchen Sterzing. Dort beginnt ein 16 Kilometer langer Rundkurs, der zweimal absolviert werden muss. Der Kurs enthält gleich zu Beginn den Anstieg nach Obertelfs, der rund vier Kilometer lang ist und eine durchschnittliche Steigung von 7 Prozent sowie einige Abschnitte mit zweistelligen Steigungswerten aufweist. Nach dem Anstieg folgt eine kurvenreiche Abfahrt, die etwa acht Kilometer vor dem Ziel endet.
Die letzten Kilometer dürften äußerst rasant verlaufen und beinhalten mehrere große Kreisverkehre, die das Fahrerfeld mit voller Geschwindigkeit durchfahren kann. Der finale Kilometer wird von einer Rechtskurve sowie einer weiten Linkskurve eingeläutet. Auf den letzten 500 Metern wartet eine gerade und leicht ansteigende Straße, die ins Zentrum von Sterzing führt. Auf den Schlussmetern ist die Fahrbahnoberfläche gepflastert.